产品内容：

试剂一：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×2 瓶，4℃避光保存。临用前配制，加入 5mL 蒸馏水，充分溶解后加入 2.5ml 试剂二，混匀。

标准品：液体×1 支，1mmol/L 无机磷标准液，4℃保存。

产品说明：

无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等，此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。

钼蓝与磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物质，通过测定 660nm 光吸收，即可计算无机磷含量。

自备仪器和用品：

离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、和蒸馏水。

操作步骤：

一、无机磷提取：

取约 0.1g 组织，加试剂一 1mL 冰上充分匀浆，4℃，10000rpm，离心 10min，取上清液，待测。二、测定：

1. 可见分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。2.打开水浴锅，调节温度到 40℃。

3.测定：

混匀后置于 40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，分别记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管。

注意：需在 40min 内完成比色。

三、组织无机磷含量计算：

组织无机磷含量(mmol/g 样本鲜重)= [C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总÷W=0.001×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W

C 标准液：1mmol/L；V 总：上清液总体积，1mL=0.001 L；W：样品质量，g。

注意事项：

1、试剂三需临用前配制，限当天使用。

2、测定前先用 1~2 个样品做预实验，如吸光值大于 1，需用蒸馏水做相应稀释。