土壤硝态氮测试盒(微量法)
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土壤硝态氮含量检测试剂盒说明书 微量法
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号:4079
规格:100T/96S
试剂一:粉剂×2 支,4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加 1mL 浓硫酸充分溶解。试剂二:液体 40mL×1 瓶,4℃保存。
标准品:粉剂×1 瓶,4℃保存。10 mg 硝酸钾,临用前加入 1.386mL 蒸馏水溶解,配成 1000μg/mL
的 NO3--N 标准液
硝态氮是指硝酸盐中所含有的氮元素,土壤中硝态氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其含量直接关系到作物的产量与品质。
在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应生成硝基水杨酸,在碱性条件下(PH>12)呈黄色,其颜色深浅与含量成正比,即可计算得硝态氮含量。
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液枪、振荡器、蒸馏水。
一、硝态氮提取:
按照土壤质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 土样,加入 1mL 蒸馏水)加入蒸馏水,置于振荡仪中振荡提 1h,25℃,10000 离心 10min,取上清待测。
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 410nm,蒸馏水调零。
2、 将 1000μg/mL NO3--N 标准液用蒸馏水 40 倍稀释成 25μg/mL 的标准溶液。
3、 操作表:
试剂名称 | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
样本(μL) | 8 | ||
标准溶液(μL) | 8 | ||
蒸馏水(μL) | 8 | ||
试剂一(μL) | 12 | 12 | 12 |
充分混匀,25℃静置 30min | |||
试剂二(μL) | 280 | 280 | 280 |
混匀,涡旋振荡,使出现的沉淀充分溶解,取 0.2mL 于微量玻璃比色皿或 96 孔板中测定 410nm 处吸光值 A,计算△A=A 测定管-A 空白管,△A 标准=A 标准管-A 空白管。 |
NO3--N 含量(μg/g 土壤)=△A÷(△A 标准÷C 标准)×V 提取÷W=25×△A÷△A 标准÷W。
W:样本质量,g;C 标准:标准溶液浓度,25μg/mL;V 提取:提取液体积,1mL。
1、 试剂一配制好后尽快使用,4℃可保存一周。
2、 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性,操作时需做好防护措施。
3、 △A 大于 1.5 时,建议将样品稀释后再进行测定。