土壤脲酶（S-UE)测试盒（微量法）
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注意：正式测定之前选择预期差异大的样本做预测定。微量法
产品内容：
试剂一：甲苯2mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：粉剂×1 瓶，临用前加入9mL 蒸馏水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：液体19mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四A 液：液体0.4mL×1 支，4℃保存；
试剂四B 液：液体1.6mL×1 瓶，4℃保存；临用前将A 液倒入B 液中混合，待用；用不完的试剂4℃保存一周；
试剂五：液体 2mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：液体 1mL×1 支，1mg/mL 氮标准液。
S-UE能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、
全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、冰、甲苯
（不允许快递）和蒸馏水。
a. 培养
测定管 | 对照管 | |
风干土样(g) | 0.05 | 0.05 |
试剂一（μL） | 20 | 20 |
振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置 15min | ||
试剂二（μL） | 90 | |
蒸馏水（μL） | 90 | |
试剂三（μL） | 190 | 190 |
混匀，放入 37℃水浴培养 24h 后，10000g 常温离心 10min，取上清液。 | ||
b. 将培养结束的上清液稀释10 倍（取0.1mL 上清液，加入0.9mL 蒸馏水）。若最终计算得到的
ΔA仍大于0.5继续稀释。
c. 标准品的准备：吸取适量的标准溶液，稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/mL。
d. 测氨量（在微量玻璃比色皿或96 孔板中加入下列试剂）
测定管 | 对照管 | 标准管 | |
稀释后的上清液（μL）/标准品 | 80 | 80 | 80 |
试剂四（μL） | 15 | 15 | 15 |
试剂五（μL） | 15 | 15 | 15 |
充分混匀，室温放置 20min | |||
蒸馏水（μL） | 90 | 90 | 90 |
混匀，于 630nm 处，蒸馏水调零，读吸光值 A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。标准曲线的建立：根据标准管的浓度（y）和吸光度（x,减去浓度为 0 的空白管），做标准曲线。
根据标准曲线，将ΔA带入公式（x）计算测定中样品的浓度（μg/mL）y值。单位的定义：每天每g土样中产生1μgNH3-N定义为一个酶活力单位。
脲酶活力（U/g 土样）＝y×10×V反总÷W÷T=60×y
10：稀释倍数；T：反应时间，1d；V反总：反应体系总体积，0.3mL；W：样本质量，0.05g。
